合他以前的实验经历,彼此碰撞之下,鲍勃产生了一些疑惑。
他的问题是:“末端修复加A碱基很好理解,是为了产生粘性末端,但进行接头连接全过程都要用到T4DNA聚合酶,让他有些不解。
这个问题比较基础,只能说鲍勃之前没有留意聚合酶的各种作用。
但陆时羡也没不耐烦,认真的回答道:“那是因为T4DNA聚合酶全程都在起作用,它的原理是不仅能够从5'至3'方向催化合成DNA,补平5'突出末端,也具有3'至5'外切酶活性,帮助对3'突出末端进行切平,最后将黏性末端DN**段转变为平末端DNA。”
紧接着,梅林也贡献了一个问题。
他颇为疑惑地问道:“我们的样本里面含有的RNA中最多的是rRNA,如果直接对最后得到的RNA文库进行测序,那么数据里面可能会存在rRNA的测序数据,这个数据我怕会有一些误差啊?”
陆时羡不断在心中点头。
梅林能想到这一点,足以见到他思维的连贯性。
没办法,这个问题确实问的很关键,几乎决定了测序工作成功与否。
而他之前都没有主动提及这一环,是想着自己亲自上手处理时候在说一下的。
但现在既然有人说到这,提前一下也不是不行。
事实上,梅林的判断还是有些保守了。